選擇適合研究的肝細胞培養試劑盒需基于實驗目標、周期及成本綜合考量,原代細胞與永生化細胞系各有核心優勢:
原代肝細胞培養試劑盒(如IPHASE兩步膠原酶灌流法試劑盒)適合藥物代謝、毒性評估等高真實性需求場景。其核心優勢在于:
功能保真性:試劑盒通過優化膠原酶濃度與灌注流程,分離的細胞存活率超90%,且維持CYP450酶、II相代謝酶等正常生理濃度,可精準模擬體內代謝環境。例如,Takara的CellartisPowerPrimaryHEPMedium支持原代肝細胞培養14天以上,仍保持尿素合成、藥物轉運等功能。
短期實驗經濟性:單次實驗成本低,試劑盒提供即用型灌流液、純化液等,24孔板可重復使用400次,適合短期藥物篩選或機制研究。
倫理與成本優勢:避免動物實驗倫理爭議,且成本僅為動物模型的1/3,符合3R原則。
永生化肝細胞系試劑盒(如SV40T或hTERT介導的永生化試劑盒)適合長期傳代、高通量篩選等場景。其核心優勢在于:
增殖穩定性:通過導入永生化基因(如SV40T抗原),細胞可傳代50代以上,群體倍增時間縮短至28小時,解決原代細胞體外增殖受限問題。例如,永生化胎肝細胞系IMF-Hep的ALB與CYP3A4表達量達原代細胞的85%,且30代內核型穩定。
功能可調控性:部分試劑盒支持iPS細胞向肝細胞定向分化,獲得功能成熟的肝細胞,適用于肝臟發育或疾病模型研究。
長期實驗成本效益:雖初始成本較高,但長期使用可大幅降低單次實驗成本,適合需要反復傳代的實驗。